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1 食品中的微生物安全1

1.1 食品安全概述1

1.2 葡萄球菌食物中毒及其流行病学特点2

1.2.1 葡萄球菌细菌性食物中毒2

1.2.2 葡萄球菌的流行病学特性3

1.3 葡萄球菌的致毒性5

1.3.1 葡萄球菌肠毒素5

1.3.2 杀白细胞毒素13

1.3.3 表皮剥脱毒素13

1.3.4 中毒休克综合征毒素14

1.3.5 其他毒素14

1.4 葡萄球菌的耐药性14

1.4.1 葡萄球菌耐药现状14

1.4.2 葡萄球菌耐药机制15

1.5 葡萄球菌生物被膜15

1.5.1 生物被膜概述16

1.5.2 葡萄球菌生物被膜概述17

1.5.3 生物被膜与食品安全20

2 葡萄球菌的鉴定与快速检测21

2.1 常规PCR技术21

2.2 多重PCR技术22

2.3 PCR方法扩增葡萄球菌相关基因23

2.3.1 实验菌株23

2.3.2 实验方法23

2.3.3 检测结果分析27

3 葡萄球菌肠毒素33

3.1 葡萄球菌肠毒素的生物学性状33

3.1.1 SEs的分型33

3.1.2 SEs的结构33

3.1.3 SEs的理化性质34

3.1.4 SEs的超抗原作用34

3.1.5 影响SEs产生的因素34

3.1.6 金黄色葡萄球菌与SEs的关系34

3.2 SEs的病理学特性35

3.2.1 SEs的致病性35

3.2.2 SEs中毒的临床表现36

3.2.3 SEs的预防、诊断与治疗36

3.3 SEs的应用36

3.4 SEs的检测37

3.4.1 动物实验法37

3.4.1 免疫血清学方法37

3.4.3 微生物仪器检测法37

3.4.4 核酸扩增方法38

4 葡萄球菌的耐药性研究48

4.1 葡萄球菌的耐药表型48

4.1.1 葡萄球菌的来源分布及耐药率趋势49

4.1.2 MRSA研究进展51

4.1.3 万古霉素耐药葡萄球菌研究进展56

4.2 基因组岛SCCmec59

4.2.1 SCCmec的结构60

4.2.2 SCCmec的类型61

4.2.3 SCCmec的分布62

4.2.4 SCCmec的进化63

4.2.5 SCCmec的检测与鉴定64

4.3 葡萄球菌耐药机制的进化和发展73

5 葡萄球菌的指纹图谱分析与基因组背景分析75

5.1 葡萄球菌传播渠道和侵袭途径的研究75

5.1.1 23株MRSA菌株的指纹图谱及基因相似性分析75

5.1.2 6株MRSA菌株的指纹图谱分析78

5.2 葡萄球菌基因来源与克隆起源的研究80

5.2.1 23株携带基因盒dfrAl2-orF-aadA2的MRCNS菌株的指纹图谱及基因相似性分析80

5.2.2 30株MRSA菌株的指纹图谱及基因相似性分析81

5.2.3 179株MRSA菌株的指纹图谱及基因相似性分析82

5.3 葡萄球菌基因组进化与流行变迁的研究84

5.3.1 MRSA菌株的多位点序列分型84

5.3.2 MRSA菌株的表面蛋白A基因分型89

5.3.3 MRSA菌株的凝固酶基因分型92

5.3.4 葡萄球菌基因组背景分析与国际流行变迁95

5.4 金葡菌基因组背景与生物被膜的相关性96

5.4.1 262株金葡菌指纹图谱及基因相似性分析97

5.4.2 262株金葡菌基因组背景研究99

金葡菌生物被膜的分子机制研究105

6.1 金葡菌生物被膜形成能力的研究与分析105

6.1.1 结晶紫染色法对流行性金葡菌生物被膜总量的定量分析106

6.1.2 XTT染色法对流行性金葡菌生物被膜代谢活性的定量分析107

6.1.3 结晶紫染色法与XTT染色法对比108

6.1.4 耐药型金葡菌与敏感型金葡菌生物被膜形成能力对比112

6.1.5 生物被膜形成能力的SCCmec基因组背景研究114

6.1.6 小结116

6.2 金葡菌生物被膜的基因型117

6.2.1 金葡菌生物被膜相关基因117

6.2.2 金葡菌生物被膜相关基因检测118

6.2.3 金葡菌生物被膜基因型分析125

6.2.4 基因组岛SCCmec与生物被膜基因型的相关性127

6.2.5 金葡菌克隆株与生物被膜基因型的相关性研究141

6.2.6 小结145

6.3 金葡菌生物被膜的形成与发展146

6.3.1 金葡菌生物被膜的形成146

6.3.2 不同阶段金葡菌生物被膜的形成特性研究147

6.3.3 基因型与生物被膜形成的相关性研究151

6.3.4 小结156

6.4 金葡菌生物被膜的抑制与清除157

6.4.1 右旋龙脑和溶菌酶质量浓度对金葡菌被膜的影响158

6.4.2 右旋龙脑和溶菌酶作用时间对金葡菌被膜的影响159

6.4.3 单独及联合方法对金葡菌黏附的抑制作用161

6.4.4 单独及联合方法对生物被膜形成的抑制作用162

6.4.5 单独及联合方法对生物被膜成熟及分化的抑制作用163

6.4.6 光学显微镜对生物被膜的观察164

6.4.7 扫描电镜对生物被膜的观察165

6.5 食品加工条件对金葡菌生物被膜形成的影响166

6.5.1 温度对金葡菌生物被膜形成的影响167

6.5.2 pH对金葡菌生物被膜形成的影响168

6.5.3 TSB配比对金葡菌生物被膜形成的影响169

6.5.4 葡萄糖质量分数对金葡菌生物被膜形成的影响170

6.5.5 NaCl质量分数对金葡菌生物被膜形成的影响171

6.5.6 小结172

6.6 金葡菌生物被膜中羧甲基赖氨酸的生成173

6.6.1 生物被膜中羧甲基赖氨酸的生成规律173

6.6.2 食品加工过程中羧甲基赖氨酸的生成规律185

6.6.3 小结191

参考文献192