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第一部分 高效液相色谱法的理论基础1

1 简要的历史评述及基本定义和方程式1

1-1 引言1

1-2 基本定义和方程式3

1-3 谱带的展宽--塔板高度和塔板数9

1-4 分辨率11

1-5 液相色谱的时间最佳化14

2-1 分辨和速度的基本原理19

2 高效液相色谱法的理论(Ⅰ)色谱柱的设计19

2-2 影响分辨率的动力学和热力学因素21

2-3 分离速度25

2-4 峰展宽的动力学和塔板高度26

2-5 实用操作条件及颗粒大小和柱长度的选择35

2-6 柱的直径40

2-7 制备规模的高效液相色谱43

注1 高斯误差曲线44

注2 保留值参数45

注3 分配等温线及к＇值47

3 高效液相色谱法的理论(Ⅱ)液相色谱中溶质与流动相及固定相的相互作用49

3-1 引言49

3-2 实验的方法55

3-3 结论71

4 高效液相色谱的理想化仪器设计73

4-1 理想的液相色谱仪73

4-2 液相色谱的仪器74

4-3 辅助设备94

4-4 结论95

第二部分 高效液相色谱法的技术97

5 液-固(吸附)色谱法97

5-1 引言97

5-2 填充物类型98

5-3 吸附剂结构及与溶质的相互作用100

5-4 高性能液-固色谱柱及柱填充物104

5-5 液-固色谱的理论模型106

5-6 溶剂在液-固色谱中的作用107

5-7 吸附剂的标准化113

5-8 实用上的问题116

6 液-液(分配)色谱法121

6-1 引言121

6-2 液-液色谱的相体系125

6-3 液-液色谱使用的载体127

6-4 涂层载体的制备128

6-5 前置柱的制备130

6-6 实用方面的问题130

6-7 离子对分配色谱法131

6-8 高载敷量的色谱柱133

7 键合相色谱法135

7-1 引言135

7-2 键合相的制备135

7-3 键合相的效率比较138

7-4 键合相色谱的柱和填充物138

7-5 键合相的色谱特性144

7-6 键合相的保留度和选择性146

8 离子交换色谱法149

8-1 引言149

8-2 离子交换剂150

8-3 离子交换色谱中的交换反应159

8-4 离子交换色谱的流动相163

8-5 离子交换色谱分离的典型例子：不饱和羧酸165

9 凝胶渗透色谱法172

9-1 引言172

9-2 分析方面的应用173

9-3 有关文献和文摘的问题174

9-4 凝胶色谱的发展174

9-5 分离过程的理论及机理175

9-6 分配系数177

9-7 柱和柱填充物178

9-8 高速凝胶色谱183

10 凝胶渗透色谱法对高聚物的鉴别188

10-1 引言188

10-2 凝胶渗透色谱的基本仪器设备193

10-3 根据凝胶色谱图计算分子量的分布196

10-4 凝胶渗透色谱的实验211

11-1 引言217

11 生物亲和色谱法217

11-2 载体基体219

11-3 间隔基222

11-4 洗脱222

11-5 例子：脱氢酶的分离223

12 液相色谱法的实用入门235

12-1 仪器235

12-2 关于液相色谱仪操作的一些问题237

12-3 固定相的选择241

12-4 流动相的选择244

13 高效液相色谱中具有典型结果的实用性实验253

实验1 液相色谱仪器死体积的影响253

实验2 柱填充物的粒度和类型对谱带加宽作用和谱带分辨率的影响256

实验3 粒度对柱性能的影响及比较球形颗粒与无定形颗粒对柱性能的影响260

实验4 粒度对分辨率和柱效影响的研究261

实验5 样品导入技术265

实验6 紫外检测器-断流扫描技术268

实验7 在特定波长监控时对组分的灵敏检测270

实验8 检测器灵敏度274

实验9 选择性和通用型检测器的串联使用277

实验10 柱温和流动相组成对溶质保留值的影响278

实验11 离子交换分离对温度的依赖性280

实验12 柱填充物的选择282

实验13 吸附相和键合相填充物之间选择性的差别285

实验14 梯度洗脱分离的最佳化287

实验15 使用梯度洗脱法分离的最佳化290

实验16 梯度洗脱在液相色谱法中的作用293

实验17 用于定量分析的困难分离的迅速展开295

实验18 定量测定-峰面积对峰高测量的精度比较299

实验19 制备色谱法301

实验20 利用分子大小来分离小分子303

实验21 马肝脱氢酶在5＇-AMP-Sepharose 4.B.上的纯化307

附录Ⅰ 高效液相色谱的检测器310

AI-1 检测器参数310

AI-1-1 噪声310

AI-1-2 响应值311

AI-1-5 其它参数312

AI-1-3 响应的线性312

AI-1-4 检测限(DL)312

AI-2 紫外吸收(UV)检测器313

AI-2-1 工作原理315

AI-2-2 检测器特性318

AI-3 折光率(RI)检测器319

AI-3-1 工作原理321

AI-3-2 检测器特性322

AI-4 移动丝检测器323

AI-4-1 工作原理324

AI-4-2 检测器特性325

AI-5 其它检测器330

AI-5-1 极谱检测器330

AI-5-2 电导率检测器332

AI-5-3 荧光计332

AI-5-4 其它装置333

AI-6 结论333

AII-1 柱的准备335

附录Ⅱ 柱填充技术335

AII-2 柱填充物的准备336

AII-3 干填充技术(粒度〉20微米)337

AII-3-1 敲击充填法337

AII-4 湿法充填步骤337

AII-4-1 所需设备337

AII-4-2 淤浆充填技术338

AII-4-3 柱头340

AII-4-5 分配色谱法的柱子制备341

AII-4-4 柱的活化和再调节341

附录Ⅲ 液相色谱设备制造厂商343

AIII-1 泵类343

AIII-2 注样阀343

AIII-3 检测器343

AIII-4 注射器供应商344

AIII-5 柱填充材料344

AIII-6 整机液相色谱仪345

附表 液相色谱仪346