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实验室规则3

实验记录及实验报告3

上篇 植物生理学实验3

第一章 细胞生理3

实验1 植物细胞原生质流动的观察3

实验2 高等植物叶绿体的分离制备与活性鉴定4

实验3 高等植物线粒体的分离制备6

实验4 植物细胞的死活鉴定及质壁分离8

一、植物细胞的活体染色与死活鉴定8

二、质壁分离的不同形式9

实验5 PAS法显示多糖10

实验6 植物染色体荧光原位杂交11

第二章 水分生理15

实验7 植物组织含水量、相对含水量及水分饱和亏测定15

实验8 植物叶片保水力测定16

实验9 植物组织水势测定17

一、小液流法17

二、压力室法19

三、热电偶湿度计法21

实验10 植物组织渗透势测定23

一、质壁分离法测定细胞渗透势23

二、冰点下降法测定植物组织渗透势24

三、用压力-容积曲线技术测定植物叶片渗透势26

四、蒸汽压渗透计测定植物组织渗透势27

实验11 植物组织自由水和束缚水含量测定（马林契克法）29

实验12 植物组织汁液浓度测定31

实验13 蒸腾速率测定31

一、吸水剂法32

二、吸水纸法33

实验14 稳态气孔计测定扩散阻力和蒸腾速率34

实验15 气孔开闭状况测定38

一、印迹法测定气孔开张度38

二、透明胶带法测定气孔开张度39

三、气孔密度和孔口总面积测定40

二、气孔保卫细胞内K+变化的观察42

一、K+对气孔开度的影响42

实验16 K+对气孔开度的影响及气孔保卫细胞内K+变化的观察42

实验17 植物水分利用效率（WUE）测定43

一、单叶水分利用效率44

二、个体或群体水分利用效率44

实验18 伤流液的收集和伤流量测定45

一、加压法46

二、容积法46

三、重量法47

实验19 伤流液中主要化学成分的分析与鉴定48

一、纸层析法鉴定伤流液中氨基酸与酰胺49

二、氨基酸自动分析仪测定伤流液中氨基酸含量50

三、伤流液中无机磷的定量测定51

实验20 植物根系水力学导度（水导）测定53

第三章 矿质营养55

实验21 植物的溶液培养和缺素症状55

实验22 根系活力测定57

一、根系总吸收面积和活跃吸收面积测定58

二、氯化三苯基四氮唑（TTC）法测定根系活力59

实验23 硝酸还原酶活性测定61

一、活体法61

二、离体法63

实验24 根系体积测定64

一、水位取代法测定根系体积65

二、图像扫描法测定根系体积65

实验25 质膜微囊泡的分离、纯化及质膜H+-ATPase活性测定66

实验26 硝态氮含量测定68

第四章 光合作用71

实验27 叶绿体色素的提取分离71

实验28 叶绿素的理化性质73

实验29 叶绿素含量的定量测定74

实验30 叶绿素荧光动力学参数测定77

实验31 改良半叶法测定光合速率79

实验32 植物净同化率测定81

实验33 氧电极法测定光合和呼吸速率82

实验34 叶面积的测定方法85

一、叶面积仪测定法85

二、透明方格法86

三、印相重量测定法（纸样称重法）87

四、打孔测定法88

五、排水量测定法88

六、系数测定法89

七、回归方程法89

实验35 红外线CO2气体分析仪测定光合、呼吸、光呼吸、CO2补偿点90

一、光合及呼吸速率测定92

二、光呼吸测定93

三、CO2补偿点测定94

实验36 光合作用系统测定植物净光合速率、蒸腾速率及其他相关参数95

实验37 RuBP羧化酶活性测定100

一、同位素法101

二、分光光度法102

实验38 淀粉磷酸化酶活性测定103

实验39 蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活性测定105

实验40 酸性转化酶和碱性转化酶活性测定107

实验41 ADPG焦磷酸化酶活性测定108

实验42 植物14CO2光合标记111

实验43 植物样本宏观放射自显影112

第五章 呼吸作用115

实验44 植物呼吸速率测定115

一、干燥器法115

二、小筐子法117

三、微量减压法118

实验45 呼吸抑制剂对呼吸作用的影响121

实验46 植物体内维生素C氧化酶、多酚氧化酶活性测定123

实验47 细胞色素氧化酶活性测定126

实验48 生物发光法测定腺苷三磷酸（ATP）127

实验49 植物氧化磷酸化效率（P/O）和呼吸控制（RC）测定130

第六章 物质代谢133

实验50 植物体内蛋白氮和非蛋白氮含量测定133

一、微量凯氏定氮法134

二、凯氏自动定氮仪法138

三、纳氏比色定氮法138

实验51 植物组织中可溶性蛋白质含量测定140

一、Folin-酚试剂法（Lowry法）140

二、考马斯亮蓝G-250染色法142

三、紫外吸收法143

实验52 植物组织中糖、淀粉和纤维素含量的系统测定144

实验53 植物组织中粗脂肪含量测定149

实验54 植物组织中核酸的提取与测定151

一、基因组总DNA的提取151

二、DNA浓度、纯度的快速测定152

三、植物组织总RNA的提取154

四、RNA浓度、纯度的快速测定155

第七章 植物激素158

实验55 植物激素的提取分离与纯化158

一、溶剂萃取法158

二、薄层层析法分离纯化160

三、C18胶柱分离法161

一、双层固相抗体型ELISA测定ABA含量163

实验56 酶联免疫法测定植物激素含量163

二、固相抗原型ELISA测定IAA含量167

实验57 芽鞘伸长法测定生长素类物质169

实验58 赤霉素对α-淀粉酶的诱导形成171

实验59 植物生长调节剂NAA对植物生根的效应172

实验60 细胞分裂素对萝卜子叶的保绿和增重作用173

实验61 IAA氧化酶活性测定175

第八章 信号转导177

实验62 脱落酸对植物气孔运动和保卫细胞质膜K+通道的影响177

实验63 激光扫描共聚焦技术测定气孔保卫细胞内游离Ca2+浓度的变化179

实验64 H+流向与植物生长模式181

第九章 生长发育181

实验65 花粉活力测定182

一、I2-KI染色测定法182

二、TTC法测定花粉活力183

实验66 花粉管生长测定184

实验67 种子生活力快速测定185

一、TTC法185

二、红墨水染色法187

三、荧光法187

实验68 谷物种子萌发时淀粉酶活性测定188

实验69 植物激素对愈伤组织形成及器官分化的影响191

实验70 乙烯对果实的催熟作用195

第十章 成熟衰老195

实验71 气相色谱法测定乙烯含量196

实验72 乙烯合成酶活性测定198

实验73 植物组织中有机酸含量测定199

实验74 植物组织中维生素C含量测定200

一、2,6-二氯靛酚滴定法200

二、荧光比色法202

三、钼蓝比色法203

实验75 果实成熟时果胶酯酶（PE）、多聚半乳糖醛酸酶（PG）活性测定205

第十一章 逆境生理208

实验76 逆境对植物细胞膜的伤害208

实验77 丙二醛含量测定210

实验78 植物组织中超氧化物歧化酶活性测定211

实验79 植物组织中过氧化氢酶活性测定214

一、紫外吸收法214

二、碘量滴定法215

实验80 植物组织中过氧化物酶活性测定217

一、过氧化物酶活性测定217

二、维生素C过氧化物酶活性测定218

实验81 苯丙氨酸解氨酶活性测定219

实验82 植物超氧阴离子自由基含量测定221

实验83 植物体中谷胱甘肽、类胡萝卜素、维生素E含量测定223

一、还原型谷胱甘肽含量测定223

二、胡萝卜素含量测定224

三、维生素E含量测定226

实验84 脯氨酸含量测定228

实验85 气相色谱法测定植物样品膜脂中脂肪酸的含量231

下篇 植物生理学基本实验技术原理237

第一章 植物材料的准备与分析方法237

一、植物材料的种类237

二、植物材料的培养237

三、植物材料的采取239

四、分析样品的处理与保存240

五、待测植物样品的分析方法241

六、实验结果的数据处理与分析241

第二章 植物生理学基本实验技术244

一、细胞器及质膜分离技术244

二、植物组织培养技术251

三、植物光合、呼吸测定技术259

四、光谱分析技术271

附录277

一、常用酸碱主要性质及配制参考表277

二、常用缓冲液277

三、几种渗透溶液的配制表282

四、混合溶液的配制方法283

五、容易变质及需要特殊方法保存的试剂283

六、各种冷却剂的组成及冷却效果表284

七、常用植物激素及生长调节剂284

八、标准剂量单位285

九、离心机转速与相对离心力的换算287