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第一章　概论1

第一节　生物显微技术的内容和应用1

第二节　生物显微技术的发展简史1

一、16世纪的显微技术2

二、17世纪的显微技术2

三、18世纪的显微技术3

四、19世纪的显微技术4

五、20世纪的显微科学5

第三节　现代生物显微技术6

一、透射电子显微镜6

二、扫描电子显微镜6

三、近场光学显微镜7

四、X射线显微技术7

五、扫描探针技术7

复习思考题9

第二章　生物制片的基本原理10

第一节　材料的采集与处理10

一、植物材料的采集与处理10

二、动物材料的采集与处理11

第二节　固定和固定液12

一、固定12

二、固定液12

三、固定时的注意事项19

第三节　冲洗与脱水20

一、冲洗20

二、脱水21

第四节　透明与透明剂23

一、透明23

二、透明剂24

第五节　包埋与包埋剂25

一、包埋25

二、包埋剂25

第六节　切片与粘片26

一、切片26

二、粘片29

第七节　染色原理及染色剂29

一、染色原理30

二、染色剂31

第八节　封藏与封藏剂37

复习思考题38

第三章　常用生物制片的基本方法39

第一节　徒手切片法39

一、概述39

二、徒手切片法常用器具39

三、徒手切片的方法39

四、注意事项40

第二节　石蜡切片法40

一、概述40

二、石蜡切片常用器具及药品40

三、石蜡切片的方法40

四、石蜡切片的注意事项45

五、石蜡切片及其染色程序总结46

第三节　冰冻切片法47

一、概述47

二、冰冻切片的主要仪器和用具48

三、冷冻切片的方法48

四、注意事项50

第四节　半薄切片法51

一、概述51

二、半薄切片常用器具及药品51

三、半薄切片的方法51

四、塑料厚切片法53

第五节　非切片制片法54

一、整体制片法54

二、离析法57

三、压片法58

复习思考题63

第四章　常用植物制片技术64

第一节　整体封片技术64

一、地木耳装片64

二、水绵装片65

三、葫芦藓整体装片66

四、葫芦藓原丝体装片66

五、马尾松花粉粒装片67

六、百合花粉粒萌发装片68

七、禾本科植物叶表皮装片69

八、蚕豆叶下表皮装片示气孔69

九、洋葱鳞片叶表皮装片70

第二节　组织器官制片技术71

一、玉米花药减数分裂制片（涂抹法）71

二、洋葱根尖细胞压片法示有丝分裂72

三、导管分离装片73

四、柿胚乳细胞胞间连丝的制片法73

五、蚕豆石蜡制片示线粒体75

六、桑石蜡制片示皮孔76

七、橘果皮分泌腔制片76

八、洋葱根尖纵切石蜡制片示细胞有丝分裂77

九、地衣原植体横切石蜡制片78

十、地钱生殖托纵切石蜡制片79

十一、葫芦藓精子器和颈卵器纵切石蜡制片79

十二、毛茛根初生构造横切石蜡制片80

十三、木槿根的次生构造横切石蜡制片81

十四、湖南山核桃花序纵切石蜡制片81

十五、木材材料制片法82

十六、三叶草叶片横切石蜡制片83

十七、百合花药横切石蜡制片83

十八、百合子房横切石蜡制片84

十九、荠菜角果纵切石蜡制片84

二十、葡萄胚纵切84

复习思考题85

第五章　常用动物组织制片法86

第一节　涂片法86

一、Giemsa染色法86

二、Wright染色法87

三、Giemsa-Wright混合染色法87

第二节　无丝分裂（膀胱印片）法87

第三节　间皮硝酸银染色制片法88

第四节　纤维性结缔组织与细胞的制片术88

一、胶原纤维88

二、弹性纤维91

三、网状纤维92

四、巨噬细胞95

五、浆细胞96

六、肥大细胞96

第五节　软骨和骨98

一、软骨98

二、骨99

第六节　血管注射技术102

第七节　消化器官104

一、常规苏木精-伊红染色法104

二、过碘酸Schiff反应（PAS）105

三、阿利新蓝染色法105

四、黏液卡红（mucicarmin）染色法105

五、小肠潘氏细胞染色法106

六、闭锁堤106

七、消化管的内分泌细胞106

八、肠肌丛（Auerbach神经丛）镀银法109

九、肝血管双色注射109

十、肝血窦内星状细胞（Kupffer细胞）活体注射显示法109

十一、肝细胞间的胆小管显示法110

十二、肝储脂细胞显示法111

十三、胰岛A细胞、胰岛B细胞及胰岛D细胞显示法111

第八节　呼吸器官113

一、取材113

二、固定114

三、嗅细胞及神经显示法114

四、肺的弹性纤维染色法114

五、肺的网状纤维染色法114

六、肺泡毛细血管网注射显示法114

七、肺泡上皮镀银法114

八、肺泡Ⅱ型细胞显示法（McNary）115

九、分离气管上皮细胞法115

第九节　泌尿器官115

一、肾的常规染色116

二、球旁细胞颗粒染色116

第十节　生殖器官117

一、精液内的精子检测117

二、三色法118

三、巴氏精液涂片染色法118

四、精子核的苯胺蓝染色法119

五、精子核的萘醌磺酸钠染色法120

六、精子顶体的结晶紫染色法120

七、精子顶体的酶活性检测——底膜法121

八、动物精子头部膜的超薄切片改进染色法121

第十一节　全鸡胚制片法122

复习思考题123

第六章　常用微生物制片技术124

第一节　细菌的制片技术124

一、简单染色法124

二、革兰氏染色法125

三、芽孢染色法126

四、荚膜染色法127

五、鞭毛染色法128

第二节　放线菌的制片技术130

一、插片法130

二、印片染色法131

三、凹载玻片培养法131

第三节　真菌的制片技术132

一、水浸制片观察霉菌的菌体形态132

二、根霉接合孢子的培养与观察133

三、酵母菌子囊孢子的培养与观察134

四、伞菌子实体的压片观察135

复习思考题135

第七章　植物染色体技术136

第一节　植物染色体常规压片技术136

一、取材136

二、预处理138

三、压片法142

四、低渗法146

五、减数分裂的制片147

第二节　植物染色体分带技术148

一、Giemsa分带148

二、荧光分带160

三、显带机制161

第三节　植物染色体银染色技术163

一、银染色技术163

二、染色体的银染色原理163

三、染色体银染色法分类及技术流程165

第四节　植物染色体核型和带型分析170

一、核型分析的意义170

二、核型分析171

三、染色体图像分析182

复习思考题184

第八章　原位杂交185

第一节　原位杂交的基本原理185

第二节　染色体原位杂交技术186

一、植物核DNA的提取186

二、探针及标记190

三、染色体制备197

四、杂交前处理200

五、杂交反应201

六、杂交后处理203

七、杂交信号的检测203

八、复染和封片206

九、观察和摄影207

十、载玻片的再杂交207

十一、对照207

十二、疑难解答208

第三节　RNA原位杂交技术209

一、取材和固定209

二、标本制备210

三、探针及标记210

四、杂交前处理211

五、杂交反应211

六、杂交后的处理212

七、杂交信号的检测和对比染色212

八、RNA原位杂交结果的评定212

第四节　原位杂交的应用213

一、植物基因的染色体物理作图213

二、染色体识别、分子核型构建和异源多倍体物种进化等214

三、减数分裂染色体行为的分析和外源染色体或染色体片段的检测214

四、基因组的空间分布215

五、植物基因表达的规律215

六、荧光原位杂交技术用于微生物多样性和原位功能研究217

复习思考题217

第九章　生物显微化学218

第一节　概述218

一、生物显微化学的技术要求218

二、生物显微化学的研究内容219

三、显微化学的研究方法219

四、显微化学一般注意事项220

第二节　无机物质的鉴定221

一、钙的鉴定与定位221

二、镁的鉴定与定位221

三、铁的鉴定与定位222

四、磷酸盐的鉴定与定位223

五、草酸钙结晶的鉴定与定位223

第三节　有机物质的鉴定223

一、糖类的鉴定与定位224

二、脂类的鉴定与定位230

三、蛋白质的鉴定与定位232

四、核酸的鉴定与定位236

五、酶类的鉴定与定位237

复习思考题242

第十章　生物显微镜243

第一节　光学显微镜的种类及性能243

一、生物显微镜244

二、荧光显微镜248

三、体视显微镜254

四、倒置显微镜256

五、相差显微镜258

六、激光共聚焦显微镜261

第二节　显微镜常用技术参数与专业名词264

一、显微镜常用技术参数264

二、显微镜常用专业名词267

复习思考题271

第十一章　电子显微技术272

第一节　透射电子显微镜结构和原理272

一、电子光学部分272

二、真空排气部分274

三、电气系统275

第二节　扫描电子显微镜的结构和原理276

一、电子光学系统276

二、信号检测及显示系统277

三、真空系统和电气系统278

第三节　透射电子显微镜的生物样品制备技术278

第四节　生物样品的负染色技术286

一、负染色样品的制备286

二、负染色液的配制287

三、负染色的操作方法288

四、影响负染色效果的因素288

第五节　扫描电子显微镜的生物样品制备技术289

一、取材289

二、前固定290

三、清洗290

四、后固定290

五、脱水291

六、更换中间液291

七、干燥291

八、样品的粘贴与安置293

九、镀膜293

十、样品观察294

第六节　扫描探针显微镜297

一、扫描隧道显微镜297

二、原子力显微镜298

复习思考题299

第十二章　生物显微摄影及显微图像分析系统300

第一节　生物显微摄影300

一、普通光学显微摄影300

二、数码显微摄影300

三、显微图像分析系统301

第二节　普通光学显微摄影技术301

一、光学显微摄影装置301

二、光学显微摄影的一般工作步骤302

三、洗印和放大307

第三节　生物显微图像分析系统310

一、生物显微图像分析系统的类型和功能310

二、生物显微图像分析系统的组成部分310

三、图像分析的主要流程312

四、显微图像分析中的数字图像基础知识312

五、几个主要的显微图像分析系统软件简介314

复习思考题326

主要参考文献327