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第一章 实验骨伤科学发展概况1

第一节 实验骨伤科学发展简史1

第二节 实验骨伤科学的主要内容2

一、基础研究2

二、应用研究2

三、发展研究3

第三节 实验骨伤科学的研究方法特点3

一、实验骨伤科研究要以中医药理论为指导3

二、实验骨伤科研究要与临床相结合3

三、实验骨伤科研究要整体实验与离体实验相结合4

四、建立“病”与“证”的动物模型4

第二章 实验骨伤科学的研究思路与方法6

第一节 实验骨伤科学的科研选题6

一、选题基本原则6

二、选题基本程序7

三、选题注意事项8

第二节 实验骨伤科的科研设计9

一、科研设计的基本内容9

二、科研设计三要素10

三、科研设计应遵循的原则12

第三节 范例解析13

一、题目与立项依据13

二、项目的研究目标、研究内容以及拟解决的关键问题16

三、研究方案及可行性分析16

四、项目的特色与创新之处18

第三章 骨伤生物学基础20

第一节 骨20

一、骨组织细胞与骨基质20

二、骨的发生发育22

三、影响骨生长发育的因素23

第二节 骨骼肌26

一、骨骼肌组织26

二、骨骼肌的发生发育与再生修复27

第三节 软骨28

一、软骨的组织结构28

二、软骨膜30

三、软骨的类型30

四、软骨的组织发生、生长、退行性变与再生31

五、软骨的损伤修复32

六、软骨组织工程32

七、参与软骨形成的主要基因和信号通路35

第四节 椎间盘35

一、椎间盘的组织结构35

二、椎间盘的血供和神经支配36

三、椎间盘的组织发生36

四、参与椎间盘形成的主要基因和信号通路37

第五节 关节37

一、关节的概述37

二、滑膜关节的结构38

三、滑膜关节的功能39

四、滑膜关节发育与形成的过程39

五、滑膜关节发生发育的调节41

第六节 神经41

一、神经系统的发生42

二、神经的生长发育42

三、神经信息的传递42

四、神经递质与神经调质43

五、受体与离子通道43

第四章 常见骨伤科疾病动物模型46

第一节 实验动物分级标准46

第二节 常用实验动物的品种、特点47

一、小鼠47

二、大鼠48

三、豚鼠49

四、家兔50

五、犬50

第三节 动物实验基本技术操作方法51

一、实验动物的抓取和固定方法51

二、实验动物的编号标记方法51

三、实验动物的麻醉方法52

四、实验动物的被毛去除方法52

五、实验动物的给药途径和方法53

六、实验动物的标本收集方法54

七、实验动物的处死方法56

第四节 常见骨伤科疾病动物模型制备56

一、急性软组织挫伤动物模型56

二、长骨干骨折动物模型57

三、颈椎病动物模型57

四、腰椎间盘突出症动物模型60

五、肩关节周围炎动物模型61

六、膝骨关节病动物模型61

七、类风湿关节炎动物模型62

八、股骨头缺血性坏死模型62

九、周围神经损伤动物模型62

十、骨质疏松症动物模型63

十一、慢性化脓性骨髓炎动物模型63

十二、骨伤常用基因工程动物模型64

第五章 骨伤组织学技术与方法66

第一节 一般骨组织技术66

一、骨组织制片的方法66

二、骨组织染色的方法67

第二节 电镜技术68

一、透射电子显微镜68

二、扫描电子显微镜69

三、其他显微镜技术69

第三节 一般组织化学技术70

一、骨组织切片的制备70

二、骨组织化学显色方法70

第四节 免疫组织化学技术73

一、实验原理73

二、非特异性着色对策与判断73

第五节 原位组织学技术75

第六节 骨组织形态计量学技术76

一、骨组织形态计量学的主要计算参数及含义76

二、全自动图像分析80

三、骨组织形态计量学的优越性81

四、骨组织形态计量学的局限性81

第六章 骨伤细胞生物学技术与方法83

第一节 成骨细胞的分离、培养、鉴定和检测83

一、成骨细胞的分离和培养84

二、成骨细胞的鉴定84

三、成骨细胞功能测定86

第二节 破骨细胞的分离、培养、鉴定和检测86

一、破骨细胞的形态及功能86

二、破骨细胞的分离与培养87

三、破骨细胞的鉴定和检测88

第三节 软骨细胞的分离、培养、鉴定和检测89

一、软骨细胞分离技术89

二、关节软骨细胞培养技术89

三、细胞因子90

四、关节软骨细胞鉴定技术91

第四节 髓核细胞的分离、培养、鉴定和检测91

一、髓核细胞分离、培养92

二、小鼠髓核细胞的检测与鉴定93

三、髓核细胞的分泌93

第五节 神经细胞的分离、培养、鉴定和检测94

一、神经细胞的分离和培养94

二、神经细胞的鉴定和检测95

第六节 骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及检测96

一、骨髓间充质干细胞的分离培养96

二、骨髓间充质干细胞的鉴定及检测97

三、骨髓间充质干细胞多向分化能力98

第七章 骨伤分子生物学技术与方法100

第一节 聚合酶链反应技术101

一、PCR的基本原理101

二、反转录PCR的基本原理101

第二节 基因重组技术102

第三节 核酸杂交技术106

一、DNA探针的制备109

二、Southern印迹法109

三、Northern印迹法110

第四节 蛋白质检测方法110

第五节 分子生物学对骨伤科相关疾病的影响111

一、中医药治疗骨关节炎分子生物学研究进展111

二、中医药治疗颈椎病的分子机制研究113

第八章 影像学与电生理技术在实验骨伤科学中的应用116

第一节 X线技术117

一、X线成像的原理117

二、X线技术的发展118

三、数字X线技术的分类118

第二节 小动物成像118

一、小动物成像的背景与原理118

二、小动物成像技术的发展119

三、小动物成像技术分类119

第三节 显微CT122

第四节 核素成像124

一、放射性核素骨显像的原理125

二、影响骨显像剂在骨中聚集的因素125

三、骨显像剂125

四、检查方法及设备125

五、显像的方式和种类分析126

六、放射性核素分析在骨伤科基础科学研究中的运用127

第五节 电生理技术128

一、生物电测量技术的原理128

二、电生理测量技术128

第九章 临床流行病学在骨伤科学中的应用132

第一节 临床流行病学发展概况132

一、临床流行病学的特点132

二、临床流行病学的任务133

三、临床流行病学研究的方法学133

四、临床流行病学对临床医学的作用和价值136

五、临床流行病学方法在中医药临床研究中的作用137

第二节 临床科研设计的基本原则与方法137

一、随机化138

二、对照141

三、盲法143

第三节 循证医学145

一、循证医学方法145

二、系统评价概述148

主要参考文献151