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第1章 基因及基因组学检测技术1

1.1 核酸制品的理化指标及其检测1

1.1.1 核酸分离纯化的原则1

1.1.2 核酸分离纯化的技术路线2

1.1.3 基因组DNA的分离与纯化3

1.1.4 质粒DNA的分离与纯化4

1.1.5 RNA的分离与纯化4

1.1.6 全自动核酸提取纯化工作站5

1.2 DNA的变性与复性及其Tm值和C0t值测定6

1.2.1 DNA变性及其Tm值的意义与测定6

1.2.2 DNA复性及其C0t值的意义和测定7

1.2.3 核酸杂交分析及核酸探针技术8

1.3 常规PCR原理与步骤9

1.3.1 PCR的基本原理9

1.3.2 操作过程9

1.3.3 热稳定性DNA聚合酶10

1.3.4 PCR引物的设计10

1.3.5 PCR扩增的模板10

1.3.6 常规的PCR扩增方案10

1.4 实时荧光定量PCR检测技术11

1.4.1 CT值12

1.4.2 荧光信号和定量数据的归一化14

1.4.3 污染的预防和热启动14

1.4.4 标准14

1.4.5 TaqMan探针技术原理15

1.4.6 SYBR Green Ⅰ荧光染料15

1.4.7 定量PCR仪16

1.5 其他非常规扩增技术16

1.6 核酸的序列测定技术18

1.6.1 双脱氧末端终止法测序18

1.6.2 全自动测序20

1.6.3 测序策略21

1.6.4 高通量测序22

1.7 基因组学检测技术24

1.7.1 结构基因组学检测技术24

1.7.2 功能基因组学检测技术25

1.7.3 比较基因组学检测技术26

1.7.4 宏基因组学检测技术26

主要参考文献27

第2章 蛋白质及蛋白质组学检测技术28

2.1 蛋白质的理化性质29

2.2 蛋白质一级结构测定31

2.2.1 水解分析31

2.2.2 蛋白质分子中末端氨基酸的分析32

2.2.3 质谱测序34

2.2.4 蛋白质的非共价复合物研究35

2.3 蛋白质高级结构分析测定35

2.3.1 仪器分析方法35

2.3.2 理论分析方法37

2.4 蛋白质组学检测技术46

2.4.1 电泳分析法47

2.4.2 层析技术47

2.4.3 质谱技术48

2.4.4 蛋白质修饰及其分析方法52

主要参考文献55

第3章 酶检测技术56

3.1 基础酶学检测技术56

3.1.1 酶反应的解析56

3.1.2 酶学常数测定57

3.2 应用酶学检测技术66

3.2.1 酶产品质检66

3.2.2 酶法检测79

3.2.3 常见酶活力测定方法85

主要参考文献103

第4章 次生活性成分检测技术104

4.1 生物碱104

4.1.1 生物碱的分类104

4.1.2 生物碱的理化性质105

4.1.3 生物碱的提取分离106

4.1.4 生物碱定性鉴别109

4.1.5 生物碱的含量测定111

4.2 醌类化合物114

4.2.1 醌类化合物的主要理化特性115

4.2.2 醌类化合物的提取分离116

4.2.3 醌类化合物的定性鉴别117

4.2.4 醌类化合物的含量测定119

4.2.5 蒽醌类化合物的结构测定120

4.3 黄酮类化合物123

4.3.1 黄酮类化合物的主要理化特性123

4.3.2 黄酮类化合物的分离123

4.3.3 黄酮类化合物的定性鉴别125

4.3.4 黄酮类化合物的定量分析127

4.4 香豆素和木脂素类130

4.4.1 香豆素类成分的主要理化性质130

4.4.2 香豆素类的提取分离131

4.4.3 香豆素类的检识132

4.4.4 木脂素类的理化性质132

4.4.5 木脂素类的提取分离132

4.4.6 木脂素类的检识133

4.5 皂苷类133

4.5.1 皂苷的性质133

4.5.2 皂苷的提取分离134

4.5.3 皂苷类成分的定性分析135

4.5.4 皂苷类成分的定量分析136

4.6 强心苷类137

4.6.1 强心苷类的主要性质137

4.6.2 强心苷类的检识反应139

4.6.3 强心苷类的提取分离140

4.7 挥发油141

4.7.1 挥发油的主要性质141

4.7.2 挥发油成分的提取141

4.7.3 挥发油成分的分离142

4.7.4 挥发油的鉴定143

4.8 抗生素143

4.8.1 抗生素的种类143

4.8.2 抗生素的效价测定144

主要参考文献147

第5章 细胞分析检测技术148

5.1 细胞的分离与培养148

5.1.1 细胞培养技术的特点与应用148

5.1.2 培养细胞生长的条件149

5.1.3 原代培养细胞的取材与分离150

5.2 细胞形态与活性的常规检测法151

5.2.1 普通显微染色观察法151

5.2.2 MTT法153

5.3 数字显微及激光共聚焦显微分析法155

5.3.1 数字显微分析法155

5.3.2 激光扫描共聚焦显微观察分析法155

5.4 流式细胞术检测技术158

5.4.1 流式细胞术的发展简史158

5.4.2 流式细胞术的基本结构和工作原理159

5.4.3 流式细胞术的应用165

主要参考文献168

第6章 功效与代谢检测技术169

6.1 保健食品功效检测与评价169

6.1.1 保健食品概述169

6.1.2 保健食品功能检测171

6.2 药理检测技术183

6.2.1 药效学检测技术183

6.2.2 药物代谢动力学检测技术191

主要参考文献198

第7章 生物安全评价方法与技术199

7.1 生物安全性评价基本方法199

7.1.1 急性毒性试验199

7.1.2 蓄积毒性试验199

7.1.3 亚急性毒性试验200

7.1.4 慢性毒性试验201

7.1.5 致癌试验203

7.1.6 致突变试验204

7.1.7 代谢试验205

7.2 各主要制品生物安全性评价205

7.2.1 食品安全性评价205

7.2.2 药物毒理及安全性评价207

7.2.3 化妆品毒理及安全性评价212

7.2.4 转基因产品的安全性评价222

7.3 质量安全认证223

7.3.1 HACCP认证223

7.3.2 GMP认证224

7.3.3 QS认证226

7.3.4 其他与生物技术产品相关的认证228

主要参考文献228

第8章 生物传感器及生物芯片技术229

8.1 生物传感器229

8.1.1 生物传感器的结构和原理230

8.1.2 生物传感器的定义与分类230

8.1.3 几种主要的生物传感器230

8.2 生物芯片237

8.2.1 生物芯片的制造238

8.2.2 生物芯片的使用和阅读241

8.2.3 各种生物芯片244

8.2.4 生物芯片的应用247

主要参考文献249