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第一章 绪论1

第一节 烟草特有N-亚硝胺1

一、烟草历史1

二、N-亚硝胺概述2

三、降低TSNAs含量的研究概况4

第二节 酶技术及其在烟草中的应用7

一、酶技术的发展简介7

二、酶技术在烟草减害中的应用7

第三节 烟草微生物的应用研究8

一、烟草微生物研究史8

二、烟草微生物在生产中的应用12

第四节 植物源物质在烟草中的应用18

第二章 TSNAs的生成、生物学作用和检测方法20

第一节 TSNAs的生成20

一、TSNAs的生成机制20

二、不同品种、不同类型烟叶中TSNAs的含量23

三、TSNAs的不同生成阶段23

第二节 TSNAs的代谢40

一、NNK代谢41

二、NNN代谢54

三、NAT、NAB代谢57

四、4种TSNAs及烟碱代谢的交互作用57

第三节 DNA损伤61

一、NNK导致的DNA损伤61

二、NNN导致的DNA损伤68

第四节 TSNAs的致癌性70

一、NNK的致癌性70

二、NNN的致癌性71

三、NAT和NAB的致癌性72

第五节 烟草中TSNAs含量的检测方法72

一、概述72

二、GC-TEA法73

三、GC-MS/MS法73

四、LC-MS/MS法73

第三章 酶技术在烟草中的应用75

第一节 酶的概况及酶工程应用75

一、酶的概况75

二、酶的催化特性75

三、酶工程的应用76

第二节 酶技术在烟草中的应用77

一、改善卷烟原料品质77

二、提高香气、改善吃味80

三、降低烟碱作用81

四、病虫害防治81

五、烟草废物利用81

六、烟草减害82

第三节 酶降低TSNAs含量的作用机制82

一、NNK的降解82

二、生物酶降解NNK途径84

三、NNK代谢的其他辅助反应88

第四节 烟碱去甲基酶对TSNAs前体物的影响89

一、烟碱转化对NNN的影响89

二、烟碱去甲基酶在烟草遗传育种中的作用90

第四章 烟草内生微生物特性与作用93

第一节 内生微生物的特性93

一、内生微生物传播93

二、内生菌的专一性95

三、内生菌的多样性95

四、烟草内生菌96

第二节 内生菌对植物的作用102

一、提高植物抗病性102

二、提高植物抗虫性103

三、提高植物对非生物胁迫的抗性104

四、促进植物生长105

第三节 内生菌的应用106

一、内生菌用于病虫害生物防治106

二、天然产物的用途开发108

三、植物促进剂109

四、生物固氮109

五、内生菌其他方面的应用展望110

第四节 烟草内生菌降低白肋烟中TSNAs含量机制110

一、降低烟叶中硝酸盐和蛋白质等物质含量111

二、降低TSNAs内生微生物的鉴定112

三、内生菌还原硝酸盐和亚硝酸盐能力112

四、内生细菌在烟草生长期和加工中对TSNAs含量的影响122

第五章 降低烟草中TSNAs的前体物——烟碱125

第一节 生物碱对烟草中TSNAs的影响125

一、生物碱与TSNAs的关系125

二、生物碱的亚硝化反应125

第二节 烟碱的降解128

一、降低烟碱的意义及途径128

二、烟碱的基本特性129

三、降解烟碱的微生物资源131

四、微生物代谢烟碱的机制133

第三节 微生物降烟碱在烟草行业中的应用137

一、降烟碱微生物在烟叶中的应用137

二、降烟碱微生物在烟草生产废弃物处理中的应用138

第六章 微生物技术在烟草调制和醇化过程中的作用140

第一节 烟草烘烤调制140

第二节 微生物在烟草调制过程中的作用141

一、烟草调制微生物主要类群141

二、烟草调制微生物种群动态141

第三节 微生物在烟草调制中对品质的影响及控制142

一、烟草调制期间微生物引起的腐烂变质142

二、烟草调制微生物对烟叶中TSNAs含量的影响142

三、微生物在烟草调制中降低白肋烟TSNAs含量的应用143

第四节 烟草醇化微生物143

一、烟叶醇化发酵143

二、烟叶醇化发酵对烟叶品质的影响145

三、烟草醇化微生物的主要类群和种群动态145

第五节 烟草醇化微生物的作用148

一、缩短烟叶醇化发酵周期148

二、微生物调控烟叶中主要化学成分含量148

三、增加烟叶香气含量和改善品质150

第七章 生物技术在烟草生产中的应用152

第一节 打叶复烤线152

一、打叶复烤工艺流程152

二、打叶复烤的质量控制155

三、加料技术研究160

第二节 卷烟生产线164

一、卷烟的概念及分类164

二、卷烟生产制造基本工艺165

三、卷烟分组均质化加工168

四、制丝生产线施加植物源减害剂工艺170

第三节 酶技术在卷烟生产中降低TSNAs的应用170

一、离线烟叶施加生物酶制剂170

二、卷烟生产过程中施加生物酶制剂171

三、生物酶制剂产业化生产工艺173

四、生物酶制剂的安全性174

第四节 典型烟草内生菌降低TSNAs的应用175

一、内生菌K16、K17和K18降低TSNAs的效果176

二、针对亚硝酸盐的菌株降低TSNAs的效果177

三、内生菌WB5降低TSNAs的效果179

四、内生菌降低白肋烟TSNAs的生产示范181

第五节 植物源减害剂降低TSNAs的应用182

一、植物源减害剂材料筛选182

二、马齿苋植物源减害剂简介183

三、植物源减害剂在打叶复烤生产中的应用184

四、植物源减害剂在卷烟加工生产中的应用185

五、植物源减害剂降低TSNAs的机制187

附录189

附录A 二维在线固相萃取LC-MS/MS法测定主流烟气中的TSNAs189

附录B 降烟碱微生物菌剂的控制处理技术规范197

附录C 常用培养基配方200

附录D 烟草微生物分离技术202

附录E 烟草微生物培养技术203

附录F 烟草微生物鉴定技术205

附录G 烟草微生物的筛选技术211

附录H 烟草内生细菌的分离方法215

参考文献217