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第1章 生物技术制药总论1

第1节 基因工程与基因工程制药步骤1

一、基因工程1

二、基因工程制药的基本步骤3

三、基因工程制药的具体步骤3

第2节 细胞工程制药9

一、细胞工程9

二、细胞工程制药9

第3节 酶工程制药12

一、酶与酶工程12

二、酶工程制药12

第4节 发酵工程制药13

一、发酵与发酵工程13

二、发酵工程制药13

第5节 蛋白质工程制药14

一、蛋白质与蛋白质工程14

二、蛋白质工程制药14

第6节 生物医学工程与生物信息工程16

一、生物医学工程16

二、生物信息工程16

思考题17

参考文献18

第2章 基因工程制药19

第1节 基因克隆表达19

一、大肠杆菌表达系统19

二、酵母表达系统27

三、昆虫细胞表达系统30

第2节 各种产物表达形式采用的分离纯化方法31

一、大肠杆菌细胞内不溶性表达产物31

二、分泌型的表达产物32

三、大肠杆菌细胞内可溶性表达产物33

四、大肠杆菌细胞周质表达蛋白33

第3节 表达产物的活性、安全性评价、稳定性考察33

一、生物活性（效价）测定33

二、安全性评价34

三、稳定性34

四、产品34

思考题35

参考文献35

第3章 细胞工程制药36

第1节 细胞、细胞工程与细胞工程制药36

一、细胞36

二、细胞工程37

三、细胞工程制药38

第2节 动物细胞工程制药39

一、动物细胞的全能性39

二、动物细胞工程制药中的转基因与细胞培养技术40

第3节 植物细胞工程制药42

一、植物细胞的特点42

二、植物细胞工程药物研究43

三、植物细胞融合与核移植技术44

四、转基因植物药物技术45

五、植物细胞培养工程48

六、植物细胞的染色体工程49

第4节 细胞工程制药的应用、前景和存在的问题50

一、临床用细胞工程药物50

二、人源化抗体的研制与“分子药田”工程51

三、细胞工程药物的安全性51

思考题53

参考文献53

第4章 酶工程制药54

第1节 酶工程制药概述54

一、酶及酶催化特性54

二、影响酶催化反应的主要因素55

三、酶的分类56

四、酶工程和酶工程制药57

第2节 酶工程制药技术57

一、药用酶的生产技术57

二、药物的酶法生产技术63

第3节 酶工程制药的现状与前景71

思考题75

参考文献75

第5章 发酵工程制药76

第1节 发酵工程制药基础76

一、微生物发酵生产的药物76

二、发酵制药工业中的微生物77

第2节 微生物制药发酵工艺85

第3节 微生物发酵工艺过程的控制90

思考题96

参考文献97

第6章 蛋白质工程制药98

第1节 蛋白质工程制药的概念99

一、蛋白质工程制药研究的核心内容和基本概念及方法99

二、改造蛋白质的一些方法99

第2节 蛋白质工程制药方法100

一、随机诱变101

二、体外重组101

三、蛋白质工程制药方法的常用目的104

第3节 蛋白质工程制药现状105

一、蛋白质定点突变改造106

思考题109

参考文献109

第7章 核酸类药物110

第1节 反义核酸药物110

一、反义药物的作用机制110

二、反义药物的设计策略111

三、反义药物的作用特点112

四、反义核酸药物的合成与纯化112

第2节 短小干扰RNA(siRNA)114

一、RNAi的作用机制115

二、RNAi的特点117

三、siRNA的制备方法117

第3节 miRNA118

一、miRNA的基本特征118

二、miRNA的作用机制118

三、siRNA和miRNA的异同119

第4节 核酸类药物的临床试验现状与前景120

一、反义核酸类药物的临床试验现状与前景120

二、RNAi的临床试验现状与前景121

思考题123

参考文献123

第8章 多肽类药物125

第1节 多肽类药物的概念和优点125

一、多肽、多肽药物的概念125

二、多肽药物的优点127

第2节 多肽药物的制备128

一、固相合成法128

二、液相合成法129

三、多肽合成仪法130

四、酶解法制备多肽130

第3节 多肽药物的稳定性、检测、制剂与给药途径131

一、多肽药物的稳定性131

二、多肽类药物制剂的分析方法132

三、多肽类药物的缓释制剂研究133

四、多肽药物的给药途径133

第4节 多肽药物的应用135

一、多肽疫苗135

二、抗肿瘤多肽135

三、抗病毒多肽135

四、多肽导向药物135

五、抗菌性活性肽135

六、细胞因子模拟肽135

七、用于心血管疾病的多肽136

八、其他药用小肽136

九、诊断用多肽136

思考题138

参考文献138

第9章 治疗性抗体药物139

第1节 抗体概述139

一、抗体的基本结构139

二、抗体的基因组成142

三、抗原识别特异性的产生143

四、亲和力与结合力144

五、类别转换145

六、药物代谢动力学146

七、效应功能146

第2节 治疗性小型化抗体149

第3节 单链抗体（ScFv）、单域抗体150

第4节 重组人鼠嵌合单克隆抗体153

第5节 重组人源化单克隆抗体154

一、人单克隆抗体155

第6节 抗体药物与化疗药物的联合应用156

思考题158

参考文献158

第10章 治疗性细胞株159

第1节 治疗性细胞株——干细胞疗法159

第2节 树突状细胞共培养的细胞因子162

第3节 治疗性克隆164

第4节 核移植与重编程168

参考文献175

第11章 细胞因子类药物176

第1节 重组人干扰素177

一、概述177

二、IFN的性质、结构和功能177

三、IFN的生物学活性和作用机制179

四、IFN的基因工程制备181

五、IFN的临床应用及不良反应183

第2节 重组人白细胞介素184

一、概述184

二、各类IL184

第3节 粒细胞集落刺激因子188

一、结构与性质189

二、G-CSF、GM-CSF的临床应用189

三、G-CSF、GM-CSF的不良反应190

四、基因重组人G-CSF和GM-CSF190

第4节 促红细胞生成素190

一、EPO基因和分子结构191

二、EPO的产生及性质191

三、重组人EPO的制备192

四、临床应用193

五、EPO的不良反应194

第5节 组织型纤溶酶原激活剂195

一、概述195

二、性质、结构和功能195

三、生物学活性及作用机制197

四、基因工程制备t-PA197

五、重组t-PA的临床应用198

第6节 肿瘤坏死因子198

一、概述198

二、TNF的分子结构与功能199

三、TNF的生物活性和临床应用200

四、TNF的制备201

思考题201

参考文献202

第12章 基因治疗203

第1节 基因治疗研究现状203

一、基因治疗的现状203

二、目前基因治疗存在的问题205

第2节 基因转移的方法206

一、基因治疗的概念及步骤206

二、基因转移方法207

第3节 基因治疗的应用与安全性211

一、基因治疗的应用211

二、基因治疗的安全性217

思考题219

参考文献219

第13章 动物基因工程药物220

第1节 动物细胞培养221

一、动物细胞培养的几个基本概念221

二、动物细胞培养的基本条件222

三、动物细胞形态224

四、哺乳动物细胞冷冻保存225

五、动物细胞的解冻复苏225

六、动物细胞的传代培养225

第2节 动物转基因技术226

一、动物细胞转基因技术226

二、转基因动物制备技术227

第3节 动物反应器与动物基因工程药物229

一、转基因动物细胞生物反应器229

二、乳腺生物反应器234

思考题235

参考文献235

第14章 植物基因工程药物236

第1节 植物基因工程236

一、植物表达载体的构建237

二、植物转化244

第2节 植物基因工程药物246

一、植物基因工程重组蛋白药物246

二、植物次生代谢工程249

思考题252

参考文献252

第15章 分子靶向药物253

第1节 概述253

第2节 细胞信号转导通路分子靶向药物254

一、Ras/MAPK通道抑制剂255

二、蛋白激酶C抑制剂255

三、环氧合酶－2选择性抑制剂257

四、端粒酶抑制因子259

五、法基尼转移酶抑制剂260

第3节 原癌基因和抑癌基因的分子靶向药物260

一、原癌基因表达的特点260

二、原癌基因的结构改变形式及其表达激活261

第4节 细胞因子受体分子靶向药物262

第5节 抗肿瘤血管形成分子靶向药物262

第6节 小型化抗体靶向药物263

第7节 自杀基因267

参考文献269

第16章 融合蛋白药物270

第1节 重组人肿瘤坏死因子受体—Fc融合蛋白270

一、肿瘤坏死因子270

第2节 重组抗肿瘤融合蛋白273

一、融合蛋白与肿瘤273

二、融合蛋白与恶性肿瘤的演进273

三、融合蛋白在肿瘤治疗、预防研究中的应用274

第3节 重组人血清清蛋白－干扰素275

一、干扰素的产生及其结构特点276

二、干扰素的治病原理276

三、已上市的衍生干扰素产品280

第4节 重组人成纤维细胞生长因子281

一、αFGF及FGFR的结构和功能281

二、生物学功能283

三、基因工程表达αFGF现状284

四、αFGF用于临床应注意的问题285

第5节 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子285

一、人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的分子生物学特征285

二、人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的临床应用288

三、人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子转基因表达研究288

第6节 白细胞介素290

一、种类和结构290

二、生物学活性291

三、IL的功能292

思考题296

参考文献296

第17章 治疗性激素297

第1节 胰岛素297

一、胰岛素分子297

二、胰岛素受体与信号转导299

三、重组DNA技术制备胰岛素产品300

四、用胰岛素合成细胞治疗糖尿病301

第2节 人生长激素301

一、生长激素释放因子与抑制因子302

二、GH受体、GH的生理作用与GH的治疗作用303

三、重组huGH与垂体性矮小304

四、huGH的代谢作用305

五、GH、泌乳与排卵305

第3节 促性腺激素306

一、重组促性腺激素306

二、促性腺激素在兽医学中的应用308

三、促性腺激素释放激素308

第4节 其他批准用于临床的重组激素309

一、重组人甲状旁腺激素309

二、重组降钙素310

三、重组促甲状腺素310

思考题311

参考文献312

第18章 血液制品和治疗性酶313

第1节 血液代用品313

一、右旋糖酐314

二、清蛋白314

三、明胶蛋白315

四、携氧血液替代品316

第2节 凝血因子和血友病318

一、凝血因子Ⅷ318

二、凝血因子Ⅸ、Ⅶa321

第3节 治疗用酶323

一、抗凝血酶（AT）323

二、溶栓剂324

三、超氧化物歧化酶329

四、其他治疗用酶330

思考题332

参考文献332

第19章 疫苗技术和分子诊断技术333

第1节 疫苗技术333

一、传统疫苗制剂333

二、基因工程疫苗技术与DNA疫苗334

三、艾滋病疫苗336

四、肿瘤疫苗337

五、佐剂技术及作用模式339

第2节 分子诊断技术342

一、分子诊断的概念及原理343

二、分子诊断的常用技术方法343

第3节 分子诊断的临床应用350

一、分子诊断与遗传疾病350

二、分子诊断与传染性疾病352

三、分子诊断与肿瘤354

四、分子诊断与个性化治疗355

思考题355

参考文献355