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第一章 概论1

第一节 抗体研究的历史1

一、抗体一词的由来1

二、抗体生成的理论2

三、抗体的结构及其多样性3

四、抗体产生技术4

五、抗体研究大事记5

第二节 抗体生成的免疫学基础6

一、免疫细胞6

二、免疫系统8

三、B淋巴细胞的成熟11

四、B淋巴细胞的活化12

五、抗体生成的反馈调节15

第三节 抗原与抗体15

一、抗原15

二、抗原抗体反应16

三、免疫网络学说17

第二章 抗体的结构与功能19

第一节 抗体的分子结构19

一、抗体分子的基本结构19

二、抗体分子的功能区结构21

三、免疫球蛋白超家族23

四、免疫球蛋白的不均一性24

五、抗体分子的附属成分28

第二节 抗体分子的基因结构和重排29

一、抗体基因的基本结构30

二、可变区基因的重组及其机制34

三、抗体多样性的来源40

四、重链恒定区基因的重组和表达41

五、Ig基因重组与B细胞的个体发育44

第三节 抗体的生物学功能46

一、抗原结合46

二、效应功能47

第三章 鼠源单克隆抗体52

第一节 鼠源单克隆抗体的产生历史与原理52

一、鼠源单克隆抗体的产生历史52

二、鼠源单克隆抗体的制备原理55

第二节 鼠源单克隆抗体的制备56

一、小鼠单克隆抗体的制备56

二、大鼠单克隆抗体的制备71

第三节 鼠源单克隆抗体的应用75

一、单克隆抗体在基础研究中的应用75

二、单克隆抗体在医学研究及疾病诊断中的应用79

三、单克隆抗体在人体内的应用81

第四章 基因工程抗体84

第一节 鼠单抗人源化85

一、鼠单抗恒定区的人源化——人－鼠嵌合抗体86

二、鼠单抗可变区的人源化87

三、关于鼠单抗人源化的评价91

第二节 小分子抗体92

一、Fab92

二、Fv和ScFv93

三、单区抗体及最小识别单位95

一、双价及多价抗体分子96

第三节 双（多）价及双特异抗体分子96

二、双特异抗体99

第四节 抗体融合蛋白101

一、含Fv段的抗体融合蛋白101

二、含Fc段的抗体融合蛋白103

第五章 抗体库技术107

第一节 初期的抗体库107

一背景107

二、初期的抗体库108

第二节 噬菌体抗体库技术109

一、噬菌体展示技术110

二、噬菌体抗体库111

第三节 大容量抗体库117

一、总抗体库的容量118

二、总抗体库的多样性120

第四节 抗体库技术的应用122

一、制备人源抗体122

二、应用抗体库技术改良抗体性能123

第六章 转人－Ig基因小鼠130

第一节 概述130

第二节 酵母人工染色体技术133

一、酵母人工染色体133

二、YAC常用载体的基本特点134

三、免疫球蛋白－YAC（Ig-YAC）基因组文库的构建及筛选136

第三节 小鼠胚胎干细胞137

第四节 基因敲除技术140

一、制备基因敲除小鼠的主要步骤140

二、小鼠免疫球蛋白基因敲除小鼠的制备143

第五节 含人免疫球蛋白转基因小鼠的构建143

一、人类免疫球蛋白基因的克隆和人Ig-YACs的构建144

二、准备小鼠ES细胞145

三、含人Ig-YACs酵母与鼠ES细胞的融合及克隆145

四、人Ig-YACs-ES细胞导入鼠卵母细胞145

五、含人Ig-YACs-ES细胞的胚胎向小鼠体内送还和子代鼠的生成147

第六节 转基因小鼠的应用149

第一节 哺乳动物细胞表达系统153

第七章 抗体的表达153

一、淋巴类细胞154

二、非淋巴类细胞155

三、抗体的高效表达155

第二节 大肠杆菌表达系统166

一、大肠杆菌表达系统的特点166

二、重组抗体片段的可溶表达167

三、以包涵体方式表达抗体片段169

一、昆虫表达系统及其在基因工程抗体中的应用170

第三节 抗体在酵母及昆虫细胞中的表达170

二、酵母表达系统172

第四节 动植物表达系统174

一、植物表达系统174

二、转基因动物表达系统178

第八章 抗体的分离、纯化及测定184

第一节 抗体的分离纯化184

一、盐析法185

二、膜分离技术185

三、色谱法188

第二节 抗体的测定208

一、抗体特异性的测定209

二、抗体含量及免疫活性的测定214

三、抗体亲和力的测定218

四、抗体测定的新方法226

第九章 抗体在疾病治疗中的应用238

第一节 概述238

一、历史回顾及现状238

二、抗体治疗的机制243

一、概述246

第二节 肿瘤治疗246

二、已上市单抗简介247

三、临床试用中的治疗性单抗251

第三节 免疫系统相关疾病的治疗254

一、自身免疫性疾病254

二、变态反应性疾病257

第四节 器官移植258

第五节 其它259

一、心血管疾病的治疗259

二、感染性疾病的治疗260

一、实验材料264

二、动物免疫264

第一节 动物免疫264

第十章 抗体相关技术264

三、技术要点及注意事项265

第二节 抗体的分离纯化267

一、盐析法267

二、凝胶过滤268

三、离子交换268

四、亲和层析269

第三节 抗体的鉴定与分析270

一、抗体的亚类测定270

二、SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）273

三、高效液相色谱与毛细管电泳分析275

四、抗体亲和力测定280

第四节 抗体标记282

一、抗体的放射性碘标记282

二、酶标记抗体284

三、生物素标记抗体286

四、荧光染料标记抗体286

五、胶体金标记抗体287

第五节 抗原抗体反应测定290

一、放射免疫法290

二、酶联免疫吸附测定（ELISA）291

三、免疫荧光法294

四、免疫组织化学技术295

五、免疫沉淀298

六、免疫印迹300

七、免疫－多聚酶链反应303

第六节 小鼠杂交瘤单克隆抗体制备304

一、融合前的准备及动物免疫305

二、细胞融合和杂交瘤筛选305

三、技术要点及注意事项307

第七节 基因工程抗体技术308

一、逆转录－PCR法（RT-PCR）克隆Ig可变区基因309

二、人－鼠嵌合抗体的构建316

三、抗体分子在大肠杆菌中的表达319

四、噬菌体抗体库技术321

五、基因工程抗体在真核细胞中的表达326

附录Ⅰ 常用数据及缓冲液配制330

一、常用缓冲液的配制330

二、氨基酸特性333

三、遗传密码334

四、氨基酸密码子的使用率334

五、常用换算数据335

六、常用放射性核素特性336

附录Ⅱ CD分子表337

索引352