图书介绍

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铜调控蛋白COPC探究
  • 李慧卿著 著
  • 出版社: 北京:化学工业出版社
  • ISBN:7122268686
  • 出版时间:2016
  • 标注页数:134页
  • 文件大小:17MB
  • 文件页数:144页
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图书目录

第1章 铜调控体系及铜蛋白家族2

1.1 铜在生物体内的必要性和毒性2

1 1.1 铜在生物体内的必要性2

1.1.2 铜的氧化损伤3

1.2 铜稳态机理4

1 2.1 细胞对铜的吸收4

1 2.2 细胞内铜离子的运输载体6

1.3 革兰氏阴性菌的铜抑制体系8

1.4 Cop家族9

1 4.1 CopC溶液结构10

1 4.2 CopC晶体结构及铜配位情况14

参考文献19

第2章 突变体MCopC的构建、表达、纯化26

2.1 MCopC的构建26

2.1.1 基因体外定点突变主要方法及原理26

2.1.2 MCopC的构建29

2.2 MCopC的诱导、表达33

2.2.1 诱导表达33

2.2.2 菌体的破碎33

2.2.3 蛋白浓度测定(考马氏亮蓝G250测定法)33

2.3 MCopC的纯化33

2.3.1 离子交换柱层析原理33

2.3.2 DE-52纤维素阴离子交换树脂的处理34

2.3.3 洗脱34

2.3.4 凝胶柱层析原理35

2.4 MCopC的检验35

2.4.1 Tri-Gly SDS-PAGE分析35

2.4.2 紫外谱的测定36

2.4.3 凝胶色谱及质谱分析38

2.5 结论39

参考文献39

第3章 CopC色氨酸残基的特性42

3.1 CopC的荧光特征42

3.1.1 不同激发波长下的CopC荧光42

3.1.2 突变CopC的荧光42

3.1.3 异于Bu rstein分类的蛋白44

3.1.4 CopC晶体结构中色氨酸的位置44

3.2 酪氨酸和色氨酸间的能量转移45

3.3 色氨酸在CopC中所处的环境47

3.4 色氨酸突变对蛋白性质的影响48

3.4.1 色氨酸突变对Cu(Ⅱ)结合能力的影响48

3.4.2 色氨酸突变对构象影响51

3.4.3 色氨酸突变对蛋白热稳定性的影响52

3.5 结论54

参考文献55

第4章 CopC稳定性58

4.1 GuHCl引起的 CopC变性58

4.2 两态模型60

4.2.1 光谱参数变化60

4.2.2 荧光相位图61

4.2.3 铜结合能力变化62

4.3 CopC和CopC-Cu(Ⅱ)稳定化能计算63

4.4 解折叠动力学64

4.5 其他影响因素67

4.5.1 pH影响67

4.5.2 温度的影响68

4.6 结论69

参考文献70

第5章 萘胺类化合物对CopC构象的干扰74

5.1 TNS对CopC构象的干扰74

5.1.1 TNS对CopC构象的干扰74

5.1.2 TNS与CopC间的作用力78

5.1.3 机理推测80

5.2 α-NA对CopC构象的干扰81

5.2.1 α-NA对CopC构象的干扰81

5.2.2 NA与CopC作用机理84

5.3 结论86

参考文献86

第6章 CopC在Cu(Ⅱ)转运中的作用90

6.1 MCopC与CopC-Cu(Ⅱ)反应常数90

6.2 MCopC与CopC-Cu(Ⅱ)反应热力学92

6.3 MCopC与CopC-Cu(Ⅱ)反应动力学93

6.4 反应机理95

6.4.1 CopC-Cu(Ⅱ)与EDTA的反应96

6.4.2 CopC-Cu(Ⅱ)与CDTA的反应97

6.4.3 CopC-Cu(Ⅱ)与MCopC的反应98

6.5 结论101

参考文献102

第7章 CopC中Cu(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)位点协同性106

7.1 两位点协同性106

7.2 结论110

参考文献110

第8章 CopC与Au(Ⅲ)离子的作用112

8.1 CopC与Au(Ⅲ)相互作用112

8.1.1 Au(Ⅲ)引起CopC荧光猝灭112

8.1.2 电势变化113

8.1.3 Au(Ⅲ)与CopC的结合常数114

8.1.4 Au(Ⅲ)催化抗坏血酸氧化受CopC的影响118

8.2 Au(Ⅲ)结合对CopC构象的影响119

8.3 结论121

参考文献121

第9章 铜在配合物与CopC间的转运124

9.1 铜配合物[Cu(SA)(Phen)Cl·H2O]124

9.1.1 铜配合物[Cu(SA)(Phen)Cl·H2O]结构124

9.1.2 配合物光谱特征126

9.1.3 配合物与EDTA的反应128

9.2 铜配合物[Cu(SA)(Phen)Cl·H2O]与CopC的反应129

9.2.1 光谱研究129

9.2.2 循环伏安分析132

9.3 结论133

参考文献133

缩略语134

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